油漆生物学方法经醉如溶菌酶蜗牛醉几丁质酶纤维素酶果胶酶等的作用破坏细胞壁或细胞膜使细胞内产物释放三类破碎细胞的方法究竟选哪种好这要看所分离的目标产物是什么目标产物的理化性质与用途是什么以及细胞的材料特点和拥有的条件第阶段:抽提与粗分离在这步骤中是将细胞内所含的被提取的目标产物抽提或溶解出来即选择定的溶剂将其溶解后再将溶解的目标产物与细胞碎片分离开来或将其固液两相分开即利用被提取物电荷中和及大分子桥联作用形成更大的分子如絮凝或依照过滤介质空隙大小进行分离如过滤或依据被分离分子大小和膜孔大小进行分离如膜分离第三阶段:分级纯化。 根据所提取各类分子的不同特点利用各类分子间的显着差异将其分开然后分别沉淀析出如蛋白质的分离采用破坏蛋白质分子水化层或电荷中和使之聚集成更大的分子团或者通过化学试剂与目标产物形成新的化合物改变溶解度而沉淀如有机溶剂等电点盐析和化学沉淀法更为简沽的方法是根据对热的敏感性大小不同采用加热变性处理除去杂蛋白如溶菌酶SOD等酶的纯化第四阶段:高度纯化利用被分离目标产物各组分的电荷性质及数量不同与离子交换剂的吸附和交换能力的不同进行分离如离子交换层析依靠范德华力极性氢键等作用将目标产物吸附于吸附剂上然后改变洗脱条件达到纯化目的如吸附层析依据目标产物与专性配基的相互作用进行精制纯化的亲和层析。 依据染料分子与目标产物之间结合的专性进行纯化的凝胶排阻层析依靠疏水作用或被分离目标产物分子大小进行分离如聚丙烯酸胺凝胶层析以有机溶剂为固定相含水溶剂为流动相进行滤纸和薄板层析对徽量物质进行纯化第五阶段:结晶与精制这是制备型生化分离的最后步通过该阶段使被分离物质转变成可利用的产品该阶段主要依据对制品的质量要求及用途来确定采用哪种方法通过减压真空冷冻真空流化或喷雾等方法干澡。若所分离物质是被用作存在形式及高级结构研究如蛋白质或DN则需保持分子的溶解或结晶状态此时应采用晶体学的结晶法。   admin